肠道阿米巴检查
阿米巴是单细胞生物。多数寄生在宿主的消化道内。生活史中有滋养体和包囊二期,前者以伪足为运动细胞器。后者有较厚的囊壁,对外环境的抵抗力较强。寄生人体的阿米巴有: 溶组织内阿米巴、结肠内阿米巴、哈氏内阿米巴、齿龈内阿米巴、微小内蜒阿米巴、布氏嗜碘阿米巴以及脆弱双核阿米巴等。仅溶组织内阿米巴对人体有侵袭组织的致病能力,其它在正常情况均不致病,仅个别种类在特殊情况下致病。溶组织内阿米巴寄生肠道,若侵袭肠粘膜下层形成溃疡引起阿米巴肠病,即阿米巴痢疾。阿米巴也可经肠道血流或直接侵袭肝脏或其他组织,引起相应组织或器官阿米巴病如阿米巴肝脓肿、阿米巴肺脓肿和阿米巴脑病等。阿米巴的实验诊断主要有病原检查和免疫学检查。
病原检查 有以下几种检查方法:
涂片法: 典型阿米巴痢疾患者的粪便呈暗红色、果酱样的脓血便,有腥臭味,主要检查活动的滋养体。被检标本必须新鲜,如搁置过久,滋养体即迅速退变而难以辨认。寒冷季节送验时,应注意保温。涂片取材应选脓血部分,滴加生理盐水,置显微镜下检查。溶组织内阿米巴与其他阿米巴主要形态鉴别见表。
阿米巴滋养体主要鉴别特征
| | 溶组织内 阿米巴 | 结肠内 阿米巴 | 微小内蜒 阿米巴 | 布氏嗜碘 阿米巴 | 脆弱双核 阿米巴 |
大 小 | 大:20~40μm 小:10~20μm | 20~ 50μm | 6~15μm | 5~20μm | 4~12μm |
活 力 | 活动迅速 有方向性 | 活动迟缓 无方向性 | 活动迟缓 无方向性 | 活动迟缓 无方向性 | 活动迅速 |
伪 足 | 手指状 伸出较快 | 短而钝圆 伸出缓慢 | 钝圆 伸出极快 | 钝圆 伸出迟缓 | 钝圆 |
内 涵 物 | 有红细胞 | 无红细胞 有细菌 | 无红细胞 有细菌 | 无红细胞 有细菌 | 无红细胞 有细菌 |
细 胞 核 | 常可见, 核仁小, 位于中央 | 可见, 核仁大, 偏位 | 可见, 核仁大, 不规则 | 不可见, 核仁大, 球状体 | 不可见, 核内有4个 染色体 |
阿米巴包囊主要鉴别特征
| | 溶组织内 阿米巴 | 结肠内阿 米巴 | 微小内蜒 阿米巴 | 布氏嗜碘 阿米巴 |
大 小 形 态 细胞核 拟染色体 | 20~50μm 圆 1~4个 棒状 | 13~25μm 圆 1~8个 看不出 | 8~10μm 椭圆 1~4个 不常见 | 8~12μm 不规则 常1个 不常见 |
包囊浓集法: 常用沉淀法或浮聚法。前者利用阿米巴包囊的比重大于水,因而沉积于水底。后者利用比重较大的溶液,将阿米巴包囊上浮,集中于液体表面。以汞碘醛浓集法和硫酸锌浮聚法较常用。
临床上常见的不典型迁延型阿米巴病,在粪便中不易查到原虫。在无症状或病变局限于右侧结肠者,常规湿涂片检出率很低。一次检出率常低于30%,间隔一日以上的三次送检,阳性率可提高至75~95%。病原检出率不稳定的原因,与阿米巴包囊在宿主粪便中间歇排放有关。粪便内查到阿米巴滋养体或包囊,必须区别于常见的巨噬细胞并与非致病阿米巴相鉴别。必要时可将涂片固定,经铁苏木素染色后观察。
培养: 改良的人工培养基种类很多,最常用的是洛克(Locke) 液营养琼脂培养基。体外培养致病性阿米巴,要有严格的培养条件。多数亚急性或慢性病例,体外培养的阳性率不高,不宜作为常规检查方法。
活体组织检查: 用乙状结肠镜直接看到的阿米巴溃疡为散在性,边缘整齐,周围有时可见一圈红晕,溃疡间粘膜大多正常。作组织活检时,取材应在溃疡边缘。脓肿穿刺液常呈棕褐色,紧靠脓肿壁部取材,较易发现滋养体。
免疫学检查: 自从阿米巴无共生物培养即纯培养建立后,溶组织内阿米巴纯抗原的制备即得到了解决。以后相继发展了多种免疫血清诊断方法,其中间接血凝试验较补体结合试验敏感。用前法检查肠阿米巴病,阳性率约为80%,检查肝脓肿,可达90%以上。检查带虫者,阳性率仅为10~40%。滴度的高低,与病情不完全一致。间接荧光抗体法与间接血凝法的敏感性和特异性相近。酶联免疫吸附试验,用于诊断阿米巴病,敏感度很高,有发展前途。目前应用阿米巴无共生物培养所得的抗原作血清学反应,虽然特异性高,但仅对急性肝脓肿或急剧发病患者有较大的辅助诊断价值,对慢性非典型患者及带虫者的检出率不高。